Archives quotidiennes : 30 janvier 2019






Anticorps de Lama et protéines taggées IgG Fc de lama


LamaLes anticorps de camélidés fournissent des outils biotechnologiques uniques en recherche (Anticorps entiers ‘hcAbs’, et fragment VHH ou ‘Nanobodies’), avec des applications prometteuses du diagnostique au thérapeutique.

Un peu d’histoire à propos des nanocorps

En 1993, de jeunes chercheurs ont découvert une nouvelle classe d’anticorps à domaine unique chez des chameaux. Ce nouveau type d’anticorps à chaîne lourde (hcIGs ou hcAbs) contient un seul domaine variable (VHH) et deux domaines constants (CH2, CH3). Cette forme rare d’anticorps se prête à la production du fragment spécifique VHH, le nanocorps qui est une alternative fascinante aux anticorps conventionnels.
Ces nanocorps peuvent être produits par immunisation classique d’animaux camélidés, mais aussi par génie génétique.
Ils présentent un intérêt tant en recherche (de l’analyse in vitro à l’imagerie moléculaire) qu’en diagnostic (comme sonde) et thérapeutique (comme médicament potentiel).

Principaux avantages des nanocorps :

  • En raison de leur petite taille, les nanocorps peuvent se lier à des épitopes difficiles d’accès aux anticorps traditionnels. Ils pénètrent aussi mieux les cellules et permettent de détecter ainsi des cibles intracellulaires ou masquées.
  • La stabilité des nanocorps est bien meilleure que celle des anticorps traditionnels.
  • Les nanocorps peuvent être facilement conjugués pour les fonctionnaliser
    (avec des agents fluorescents pour détecteur leur cible, avec des agents toxiques pour les adresser à des cellules et les tuer, ou avec des protéines, des résines, …)
  • Les nanocorps sont plus faciles à produire et modifier/optimiser
    par génie génétique, à partir d’une variété d’hôtes, de façon contrôlée.

Les Nanocorps sont utilisés pour leur réaction spécifique sur les antigènes cibles dans divers immunoassays, imagerie cellulaire et de l’immuno-targetting.
La partie Fc (heavy chain – non spécifique) est utilisée comme un tag (marqueur) que l’on fusionne à une protéine (recombinante) par fusion génétique. Ces LamaFc-Protéines servent d’immunogènes (pour de l’immunisation), et peuvent aussi servir comme antigène marqué dans divers immunoassays (en coating, ou en utilisant des anticorps secondaires -anti Ig de Lama-).

 

Protéines fusionnées avec les IgG Fc de lama :

Concues pour de l’immunisation (et d’autres applications: immuno-targetting, immunoassays)

  • Immunogénicité de la protéine taguée améliorée : Le tag ‘IgGFc’ a une faible immunogénicité, mais il peut favoriser la dimérisation des protéines
  • Pharmacocinétique : longue demi-vie et bonne stabilité
  • Haute pureté (Fig 1)
  • Haute activité (Fig 2)
  • Faible taux d’endotoxine (< 10 UE / mg).
Lama IgG2b Fc tag HumaineLama IgG2b Fc tag Humaine-2
Fig 1 : PD-1, Llama IgG2b Fc tag humaine (#PD1-H5259 ) sur SDS-PAGE dans des conditions dénaturantes (R). La pureté de la protéine est supérieure à 95%.BAFF His Tag humaine immobilisée, (#BAF-H5248 ) à 5 μg/mL (100 μL/puits) peut se lier à la BCMA Llama IgG2b Fc Tag Humaine, ( BCA-H5259 ) plage de 0,02-0,4 ng/mL.

 

> Liste des protéines conjuguées avec le tag lama IgG Fc (exclusif) :

MoleculeCat. No.Product DescriptionStructure
BCMABCA-H5259Human BCMA, Llama IgG2b Fc Tag, low endotoxinStructure BCMA
CD19CD9-H5250Human CD19 (20-291), Llama IgG2b Fc Tag, low endotoxinStructure CD19
CD30TN8-5250Human CD30, Llama IgG2b Fc Tag, low endotoxinStructure CD30
CD38CD38-H5252Human CD38, Llama IgG2b Fc Tag, low endotoxinStructureCD38
CD47CD7-H5251Human CD47, Llama IgG2b Fc Tag, low endotoxinStructure CD47
LAG-3LA3-H525cHuman LAG-3, Llama IgG2b Fc Tag, low endotoxinStructure LAG-3
PD-1PD1-H5259Human PD-1, Llama IgG2b Fc Tag, low endotoxinStructure PD1
PD-L1PDL-H5250Human PD-L1, Llama IgG2b Fc Tag, low endotoxinStructure PD-L1
Siglec-2SI2-H525aHuman Siglec-2, Llama IgG2b Fc Tag, low endotoxinStructure Siglec
Siglec-3CD3-H5259Human Siglec-3, Llama IgG2b Fc Tag, low endotoxinStructure Siglec-3

Accédez à plus de protéines recombinantes taggées LlamaFc.

 

Pour une utilisation future de biopanning en phage display, les protéines biotinylées correspondantes sont recommandées. Ces protéines peuvent être fixées à des surfaces recouvertes de Streptavidine (ex Microplaques ELISA) pour du criblage à haut débit.

> Liste des protéines conjuguées avec le tag lama IgG Fc (exclusif) :

MoleculeCat. No.Product DescriptionStructure
BCMABC7-H82F0Biotinylated Human BCMA / TNFRSF17 Protein, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™)Structure BCMA Fc Avitag
CD30CD0-H82E6Biotinylated Human CD30 / TNFRSF8 Protein, Avi Tag (Avitag™)Structure CD30 Avi His Fc
CD38CD8-H82E7Biotinylated Human CD38 Protein, Avi Tag (Avitag™)Structure D38 Avi His
CD47CD7-H82E9Biotinylated Human CD47 Protein, Avi Tag (Avitag™)Structure CD47 His Avi
LAG-3CD7-H5251Biotinylated Human LAG-3, Mouse IgG2a Fc Tag, (Avitag™)Structure LAG-3 mFc Avi
PD-1LA3-H525cBiotinylated Human PD-1, (recommended for biopanning)Structure PD-1 Avi His
PD-L1PD1-H5259Biotinylated Human PDL-1/B7-H1, (recommended for biopanning), Avi Tag (Avitag™)Structure PD-L1 Avi His
Siglec-2PDL-H5250Biotinylated Human Siglec-2, Fc Tag, (Avitag™)Structure Siglec-2 Fc Avi
Siglec-3SI2-H525aBiotinylated Human Siglec-3 / CD33 Protein, (Avitag™)Structure Siglec-3 Avi His

Accédez à plus de protéines recombinantes Avi-taggées.

 

Immunoréactifs de lama :

> Anticorps secondaires de Lama

Les anticorps de lama immunisés envers des IgG de différentes espèces et purifiés par affinité puis marqués par différents marqueurs fluorescents, la biotine ou l’HRP, sont utilisés dans les immunoassays.

Llama AbAnti Mouse IgG(H+L)
Lyo(1mg) or 2mg/ml (50&500μl)
Anti Rabbit IgG(H+L)
Lyo(1mg) or 2mg/ml (50&500μl)
CF488A204542449
CF5682045520450
CF5942045620451
CF640R2045720452
CF6472045820453

 

> Anticorps de Lama immobilisés

Llama Igg Coupled 4% Agarose Beads OOIB00006, 2 ml

 

> Anticorps de Lama pour Controles

 Unconj.BIOTINFITCHRP
Control Normal Llama IgGXR-8001XR-8013XR-8005XR-8009
Control Normal Llama IgG1XR-8002XR-8014XR-8006XR-8010
Control Normal Llama IgG2XR-8004XR-8016XR-8008XR-8012
Control Normal Llama IgG3XR-8003XR-8015XR-8007XR-8011

 

> Sérum et Ig de Lama

Normal Llama serumOOIB00013, 2mlOOIB00012, 10ml
Llamma IgOOIB00043, 10mg– – –
Llamma IgGOOIB00044, 10mg– – –

 

> Anticorps secondaires anti Ig de Lama

Anti-Llama IgG (H+L)Goat antiRabbit anti
Unconjugated41R-1045, 1 mg41R-1046, 1mg
HRP43R-1284, 1 mg43R-1290, 1mg
AP43R-1281, 500 μg43R-1287, 500 μg
Biotin43R-1282, 1 mg43R-1288, 1 mg
FITC43R-1283, 1 mg43R-1283, 1 mg
Rhodamine43R-1285, 1 mg– – –
RPE13415, 1 unité– – –
APC13393, 1 unité– – –

Accédez à plus d’immunoréactifs et anticorps de Lama.

 

En savoir plus :

  • Voir l’article Nano-Anticorps
  • N’hésitez pas à nous demander des produits & services similaires: Camel/Alpaga antibodies, custom production, antibody purification …

A savoir que les VHH peuvent être produits à partir d’une large gamme d’immunogènes (nucléotides naturel ou modifié, peptide avec ou sans modification post-traductionnelle, protéine, microorganisme, haptènes…).

Cela passe par l’immunisation de lamas, puis la construction d’une bibliothèque de phage display (phages comportants l’ADNc codant pour le VHH qui sont utilisée pour présenter les VHH dans des tests), la sélection des phage/VHH d’interêt, et enfin la production (qui peut être à grande échelle).

Les nanocorps ont une plus grande stabilité que les anticorps classiques,
. conformationnelle et thermique (jusqu’à 60°C / 140°F)
. et chimique (il supportent une plus large gamme de pH).