Quelle est la 1ere étape pour choix anticorps secondaire ?
Posted: Tue 9 Dec 2014 17:55Quelle est la 1ère considération à prendre en compte pour le choix de mon anticorps secondaire ?
Vérifier l’espèce hôte du ou des anticorps primaires cibles ainsi que celle du modèle d’étude
Si l’anticorps primaire est fait chez la souris : choisir un anti-souris. Si vous utilisez en parallèle un 2ème anticorps fait chez le lapin (multimarquage) : choisissez un anti-lapin « épuisé* sur la souris » et un anti-souris « épuisé* sur le lapin ».
*« épuisé » signifie ici « pré-adsorbé sur » les protéines sériques de souris ou lapin. Ce traitement est souvent mentionné sous la forme « min X ….. Sr Prot » où les « … » représentent la liste des espèces sur lesquelles l’anticorps est épuisé.
Considérez également l’espèce de votre modèle d’étude
Si vous travaillez sur des échantillons protéiques purifiés, cela n’aura pas grand intérêt mais si vous travaillez sur un tissu ou des cellules humaines, par exemple, il peut être utile d’utiliser un anticorps épuisé* sur l’humain.
Vérifier l’espèce hôte du ou des anticorps primaires cibles ainsi que celle du modèle d’étude
Si l’anticorps primaire est fait chez la souris : choisir un anti-souris. Si vous utilisez en parallèle un 2ème anticorps fait chez le lapin (multimarquage) : choisissez un anti-lapin « épuisé* sur la souris » et un anti-souris « épuisé* sur le lapin ».
*« épuisé » signifie ici « pré-adsorbé sur » les protéines sériques de souris ou lapin. Ce traitement est souvent mentionné sous la forme « min X ….. Sr Prot » où les « … » représentent la liste des espèces sur lesquelles l’anticorps est épuisé.
Considérez également l’espèce de votre modèle d’étude
Si vous travaillez sur des échantillons protéiques purifiés, cela n’aura pas grand intérêt mais si vous travaillez sur un tissu ou des cellules humaines, par exemple, il peut être utile d’utiliser un anticorps épuisé* sur l’humain.