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Procédure de rinçage colonne Uptipshere NH2 ?

PostPosted: Tue 22 Dec 2015 16:16
by ursulito
Bonjour,

Pourriez-vous me renseigner au sujet de la procédure de rinçage associée à la colonne Uptipshere NH2 ?
(utilisation en phase normale et phase inverse)

cordialement

Re: Procédure de rinçage colonne Uptipshere NH2 ?

PostPosted: Wed 23 Dec 2015 10:44
by yayot
Bonjour,

Tout dépend des dimensions de ta colonne ( longueur et diamètre interne).
Il faut penser en volume de colonne
Ex : colonne 250 x 4,6 mm remplie avec une silice poreuse 5µm
La volume de vide qui correspond au volume de colonne à remplacer est : PI x (Diamètre)² / 4 x longueur x volume
Soit : (3,14159 x 0,46² x 25 x 0,67) /4 = 2,8ml
En phase normale, il faut 10 à 15 volumes de colonne par solvant pour bien rincer ou conditionner une colonne soit 30 à 45ml.
Il faut être très vigilant à la miscibilité des solvants en fonction du mode d’utilisation d’où la procédure ci-dessous que j’utilise :

En Phase inverse et en échange d’ions (présence d’eau et peut être de tampon)
- Eau / MeOH 90/10 sans tampon
- Méthanol
- Acétonitrile
- Dichlorométhane
- Méthanol
- Eau / MeOH 90/10 sans tampon
-retour à ta phase mobile aqueuse

En phase normale (les solvants doivent être de préférence anhydre)
-Hexane
-Dichlorométhane
-Isopropanol
-Dichlorométhane
-retour à ta phase mobile

Voilà
Bonne journée ursulito