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Montée en pression : colonne Zorbax XDB C18

PostPosted: Wed 23 Dec 2015 11:42
by guivez
Bonjour

J’ai une question concernant les colonnes Zorbax Eclipse XDB-C18.
Nous avons eu, lors de l’installation de cette colonne, un phénomène étrange : la colonne est montée en pression très rapidement pour devenir inutilisable. Nous l’avions stocké sous 100% Méthanol et conditionné directement pour notre analyse en isocratique avec un mélange tampon phosphate pH 3 / CH3OH 90/10
Après changement de consommable, nettoyage de la chaine, le phénomène a disparu avec l’utilisation d’une colonne neuve.

Je n’arrive pas bien à comprendre pourquoi, auriez-vous une idée ?

D'avance merci !

Re: Montée en pression : colonne Zorbax XDB C18

PostPosted: Wed 23 Dec 2015 12:50
by Interchim
Bonjour Guivez,

L'hypothèse que nous pouvons émettre serait que le tampon phosphate aurait cristallisé dès la mise en conditionnement de votre colonne car elle était stockée sous 100% méthanol.
Avec une colonne neuve, généralement testée et stockée avec 20 à 30% d’eau, le conditionnement se serait effectué « normalement », sans précipitation du tampon.
En conséquence, nous vous conseillons de stocker vos colonnes avec au moins 30% d’eau pour éviter que ce type de problème se reproduise.
Egalement, ne jamais arrêter la circulation de la phase mobile sur la colonne HPLC avec ce type de tampon pour éviter la cristallisation.
Enfin, rincer votre colonne avec une phase mobile à forte proportion d’eau sans tampon avant de la stocker.
Les temps de conditionnement et de rinçage doivent être réalisés avec 10 à 15 volumes de colonnes. (30 à 40ml sur une colonne 250 x 4,6 mm 5µm)

Salutations,
Interchim