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Problème de séparation en mode HILIC

PostPosted: Tue 31 May 2016 11:23
by Anastasia
Bonjour, bonjour,

actuellement en développement, j'ai un problème de séparation en mode HILIC avec ma colonne Uptisphere CS Evolution HIT.
J’injecte un échantillon aqueux et j’obtiens des pics très larges et ma séparés.
Le temps d’analyse est très long, je suis en isocratique 60/40 acétonitrile/Eau
C’est une colonne Core Shell 2.6 100mm en 3,0mm, débit 0,5ml/min
PS : J’ai fait un test avec du méthanol et c’est pire.

Qui peut me conseiller ?

Merci d'avance ;)

Re: Problème de séparation en mode HILIC

PostPosted: Tue 31 May 2016 15:48
by Damien
Salut,

Et oui, le mode Hilic n’est pas de la phase inverse.
Solubilise ton échantillon dans l’acétonitrile avec très peu d’eau (5 à 15% d’eau)
La forme de pic devrait être moins large.
Test un gradient Acétonitrile / H2O
De 95 /5 à 50/50 en 15min
Augmente un peu le débit si les pics sont symétriques avec ses conditions pour diminuer le temps d’analyse

NB : Il me semble que le mode Hilic ne fonctionne pas bien avec du méthanol, à vérifier

a+

Re: Problème de séparation en mode HILIC

PostPosted: Tue 31 May 2016 16:06
by Anastasia
Bon, je vais suivre tes conseils et voir ce que ça donne... Je reviendrai sur ce forum si les résultats restent mauvais ;)