Rufea wrote:Tout est dans le titre du message, je rencontre un problème de montée en pression avec une colonne Zorbax SB-C18. Je ne sais pas à quoi cela peut être dû et sur quoi investiguer du coup, quelqu'un aurait-il une idée ? Merci à vous
Rufea, il peut y avoir plusieurs causes à ce phénomène :
1/ problème de colmatage de la colonne :
* remplacer la colonne par un union 1/16 1/16 femelle afin de localiser le problème (bouchage colonne ou système)
NB : attention de ne pas travailler à trop haut débit et pression (pas >50 bars) pour éviter d’exploser la cellule UV
* si vous utilisez des cartouches de garde ou filtre en ligne, les enlever pour voir si le problème persiste et penser à les changer
*Si la tête de colonne est bouchée, il faudrait changer le fritté en tête de colonne mais difficile avec les nouvelles colonnes compatible haute pression donc faites un rinçage avec des solvants organiques miscibles entre eux pour dissoudre le précipité.
Réaliser l’opération à faible débit avec la colonne retournée (pas plus de 80 à 100 bars)
Procès long mais pas garantit, pensez à mettre des cartouches de gardes si vous ne l’avez déjà pas envisagé!!!
* tubulures obstruées : changer la tubulure et réduisez le diamètre pour diminuer vos volume extra colonne (une petite optimisation au passage qui ne coute pas cher)
* problème de préparation d'échantillon (filtrer votre échantillon sur du 0.45µm voir 0.20µm si les particules dans la colonne sont <3µm)
2/ débit trop important avec une trop grande viscosité de l'éluant en mode gradient qui met en sécurité votre pompe et stop l’analyse :
-Baisser le débit
-Travailler à une température plus élevée qui diminuera la viscosité des solvants mais diminuera aussi les temps de rétention
Ceci devrait vous aider, tenez moi au courant !
Posted: Wed 19 Nov 2014 12:39