Purification d'anticorps par affinité

rProtein A immobilisée: IPA-400HC


  • Très haute capacité de fixation : 40 mg/ml hIgG

  • Haut débit : jusqu'à 400 cm/heure

  • Stabilité chimique et mécanique

  • Pas de contact avec des produits humains ou animaux

  • Soumis au DMF aux USA

  • Après 100 cycles, plus de 85% de capacité de fixation est conservé


IPA400-HC est un gel Protéine A recombinante, couplé à de la Sépharose®, chimiquement stable et à Haute Capacité. Ce gel est adapté à la purification de monoclonaux et polyclonaux à grande échelle.

Idéal pour la capture rapide d'immunoglobulines issues de surnageant de culture, pour les applications les plus exigentes (faible taux de relargage, faible concentration d'IgG, grands volumes).

La protéine A recombinante est exprimée dans E.Coli, produite dans un milieu exempt en protéines animales. Elle est purifiée parfaitement par plusieurs étapes de chromatographie.


Applications


  • Purification des immunoglobulines de souris et humaines

  • Echantillons très dilués ou en grands volumes

  • Séparation des sous classes d'IgG d'un sérum de souris

  • Immunoprécipitation

  • Immobilisation covalente d'anticorps pour l'immuno-purification d'antigènes

Spécifications de la rProtéine A-Sepharose®


 

Capacités de fixation (IgG humaines)

Capacité statique : 40 mg/ml

Capacité dynamique : (30 cm/h)

5% d'élution : 28 mg/ml

10% d'élution:  31 mg/ml

Relargage:  < 5 ng/ml de protéine A

Stabilité : plus de 85% de la capacité de fixation

est conservée après 100 cycles de lavage à la soude 0,1N

Matrice:  Sépharose® FF 6%

Flux maximum : 400 cm/h

Stabilité chimique


La protéine A recombinante est très stable dans des conditions de températures et de pH extrêmes. Immobilisée, elle conserve ses capacités de fixation et possède un très faible taux de relargage même après de multiples traitement drastiques .

Cycle

Capacité (% initial)

Protéine A dans l'éluat

1

100%

2,5 ng/ml*

2

100%

2,4ng/ml*

16

100%

1,5ng/ml*

32

>95%

6,7ng/ml*

100

>85%

3,3ng/ml*

*Valeurs réprésentatives. Eluat: IgG polyclonal humain 7,4-8,5mg/ml

Références:

IPA-300

IPA-400

IPA-400HC

Composition

Agarose 6%

Agarose fortement réticulé 6%

Sépharose®6%

Taille des billes

60-165 µm

60-165 µm

-

Ligand

Protéine A recombinante

Protéine A recombinante

Protéine A recombinante

Densité du ligand

3.5 mg/ml

3.5 mg/ml

-

Capacité de fixation

18-22 mg/ml

18-22 mg/ml

40 mg/ml

Stabilité chimique

Stable en tampon utilisé en chromatographie Protéine A

Echelle de pH

3-10

3-10

3-10

Relargage Protéine A

< 3 ng/ml

< 3 ng/ml

< 5 ng/ml

Régénération

pH 2-11

pH 2-11

 

CIP

0.1 M NaOH

0.1 M NaOH

 

 

 

Matrice plus rigide que IPA300

 

 

 

Supporte un débit 3 fois plus élevé

 

Débit

30-100 cm/hr

30-300 cm/hr

Maxi 400 cm/hr

 

Pour commander:

Désignation

Références

Quantité

Immobilized rProtein A™

IPA-300

5 ml

Immobilized rProtein A™

IPA-400

5 ml

Immobilized rProtein A™

IPA-400HC

5 ml

Immobilized rProtein A™

IPA-400HC

20 ml

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