Antibiotiques et Antifongiques
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Antibiotiques et Antifongiques |
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Pour la culture in vitro de bactéries et des cellules animales, il est essentiel d’éliminer les souches bactériennes et les champignons indésiréables. La plupart des vecteurs, aussi bien d’ADN plasmidique que phagique, présente des gènes codant pour la résistance d’antibiotiques. Les vecteurs sont identifiés par la résistance qu’ils apportent à la bactérie hôte pour la croissance en présence d’antibiotique. Les antibiotiques et les antimycotiques fonctionnent de différentes manières pour agir sélectivement sur les organismes à éliminer tandis que les cellules à cultiver sont maintenues en bonne santé. Les milieux liquides contenant les antibiotiques sont typiquement préparés en ajoutant la solution antibiotique à un milieu autoclavé refroidi à 50°C. Les solutions antibiotiques peuvent aussi être appliquées directiquement sur les boîtes d’agar et vaporisées régulièrement à la surface. Les milieux liquides et les boîtes d’agar contenant les antibiotiques doivent être stockées à 4°C pendant 30 jours maximum pour maintenir leur efficacité. Sans autre indication, tous les antibiotiques peuvent être préparés avec de l’eau distillée, filtrée stérile et stockés à –20°C. |
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n-Octyl-b-D-thiogucopyranoside - Réactif d’extraction de protéine de fusion |
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| La première étape pour purifier ou caractériser une protéine recombinante consiste à dégrader la cellule et à libérer la protéine. Comme cette étape est le point de départ des étapes suivantes, le mode d’extraction ne doit pas dégrader la protéine d’intérêt. | Le n-Octyl-b-D-thiogucopyranoside offre une méthode douce pour lyser les cellules bactériennes, tout en assurant une extraction efficace des protéines recombinantes à partir d’E. coli. Les rendements avec le n-Octyl-b-D-thiogucopyranoside dépassent ceux obtenus par les méthodes standard de sonication. |
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| pBR322 |
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| pBR322 est un vecteur de clonage à usage général comprenant ApR et TcR. En plus des sites de clonage par inactivation indiqué sur le diagramme, Bsc I (iso-Cla I) et Hind III sont également disponibles. Ces sites sont sités dans la région promotrice de la tétracycline. Si un décalage du cadre de lecture se produit, on obtient des transformants ApRTcS. | ||||
| Nature | Réf. | Qté | ||
| pBR322 | UP030302 | 25 µg | ||
| pBR328 |
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| pBR328 est un vecteur de clonage à usage général comprenant ApR, TcR et CmR. Ce vecteur, dérivé de pBR325, a le site bom (base de mobilité) délété et ainsi non mobilisable. Il convient aux applications biologiques les plus rigoureuses. | ||||
| Nature | Réf. | Qté | ||
| pBR328 | UP032802 | 25 µg | ||
| pUC18 |
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| pAT153 est un dérivé de pBR322 dont le site bom (base de mobilité) délété. Le vecteur est ainsi non mobilisable et mieux maintenu dans la bactérie que pBR322. De plus, la délétion de 703pb contient la région contrôlant le nombre de copies ; l’absence de cette région dans pAT153 permet d’augmenter le nombre de copies de 1,5 à 3 fois plus. pAT153 code pour la résistance à l’ampicilline et à la tétracycline. | ||||
| Nature | Réf. | Qté | ||
| pAT153 | UP032602 | 25 µg | ||
| pAT153 |
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Ce plasmide a un site de multi-clonage dans le fragment lacZa. Les inserts clonés dans ce site disruptent l’activité b-Galactosidase et produisent des colonies blanches dans les boites de X-Gal/IPTG. Il code pour la résistance à l’ampicilline. |
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| Nature | Réf. | Qté | ||
| pUC18 | UP033002 | 25 µg | ||
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