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Bonjour,

Je travaille sur une purification avec cette colonne (colonne Uptisphere NH2 5um 250x4,6mm) et je souhaiterais améliorer la résolution de mes pics d'Arabinose et Galactose.
Quelqu'un aurait-il des pistes de reflexion à me proposer ?
Merci!

Bonjour JaverABT,

Il me manquerait quelques précisions pour à mon tour pouvoir vous communiquer une réponse plus précise, voici quelques pistes d'ordre général pour améliorer votre résolution :

Diminuer si possible la granulométrie afin d'augmenter l'efficacité de la colonne tout en diminuant la longueur de cette dernière pour limiter l'augmentation de pression.
La sensibilité serait augmentée par la diminution du diamètre interne et vous permettrait d'avoir des pics plus hauts et donc un meilleur rapport signal / bruit.

Egalement, pour avoir des pics plus fins et donc par conséquence plus hauts serait de diminuer tous les volumes extra colonnes. La diminution de ces derniers passe par les points suivants :
- Boucle d'injection au volume exacte de votre volume d'injection pour éviter la dilution de l'échantillon dans le système,
- Capillaires en entrée et en sortie de colonne les plus fins possibles en diamètre interne.
- Diminution au maximum de la longueur du capillaire en sortie de colonne pour éviter que les pics ne se remélangent par des effets de bords. Il faut vraiment la longueur minimale possible pour garder toute la séparation qui a été faite dans la colonne et avoir des pics très fins.

J'espère que ces recommandations pourront vous être utiles... et qu'elles vous apporteront une meilleure résolution.

Bonne journée,

ISA

En effet, je pense qu'il serait plus facile de vous aider avec davantage d’éléments.
Je ne sais pas avec quel gradient vous travaillez, au cas où, je vous recommanderais de travailler avec un gradient de phase mobile afin de diminuer la largeur de vos pics.
Comme celui-ci :
Phase mobile ACN MetOH H2O
0 70 10 20
15 minutes 55 25 20

Ce dernier devrait vous permettre d'avoir des pics plus fins sans aller plus loin dans l'optimisation de votre système ou dans le choix de la colonne.