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purification microARN: avantages "Silicon Carbide" méthode?

PostPosted: Wed 23 Dec 2015 12:11
by anthese
Bonjour,

Pour établir la purification des microARN j'utilise les méthodes classiques d'isolement. Cependant, on m'a récemment dit que le meilleur produit d'isolation non biaisée est la technologie au carbure de silicium (Silicon Carbide). Pouvez vous m'en dire un peu plus à ce sujet?

Cordialement

Re: purification microARN: avantages "Silicon Carbide" métho

PostPosted: Wed 23 Dec 2015 12:58
by thomifra
Bonjour,

Contrairement à l'ARN messager et aux grands ARN, un léger changement dans la composition en bases des microARN (miARN) va considérablement modifier le contenu en GC des molécules et sa préférence de fixation sur leurs cibles. Il est généralement supposé que les méthodes classiques d'isolement d'ARN fonctionnent aussi bien pour tous les miARN sans parti pris. Il a été montré lors d'une étude (Norgen me semble t-il) que la teneur en GC modifie l'efficacité de purification dans la plupart des méthodes à base de phénol testés, et que le meilleur produit d'isolation non biaisée est la technologie au carbure de silicium (Silicon Carbide).

Les avantages de cette technologie sont les suivants:

1) Une procédure simple et rapide sans extractions longues au phénol: chloroforme, filtration ou précipitation.

2) Biais minimal lié au contenu en GC lors de l'isolement d'ARN à partir de divers types d'échantillons, y compris les cellules, les fluides corporels et les tissus.

3) Isolation efficace de l'ARN à partir d'échantillons biologiques à faible teneur en ARN, dont le plasma, le sérum ou l'urine

Bien à vous