Page 1 of 1

Protocole Elisa peptides libres

PostPosted: Tue 30 Sep 2014 12:46
by Mista
Bonjour,

quelqu'un pourrait-il me renseigner sur le protocole d'utilisation pour ce produit : ELISA peptides libres ?
Merci

Re: Protocole Elisa peptides libres

PostPosted: Tue 30 Sep 2014 12:47
by Jaelle
Ci dessous le protocole que j'utilise :

1/ Coating des plaques (Plaques polystyrène 96 puits fond plats Nunc Maxisorp)
100 µl par puit du peptide à 5 µg/ml en tampon PBS 1X
Incubation une nuit à 4°C
3 lavages en PBS 1X-tween 20 0,1 %

2/ ELISA

Les anticorps sont dilués dans une solution de PBS 1X-Tween 20 0,1 %-BSA 0,2 %
Incubation des anticorps (Pré immun, Sérums de lapin) 100 µl, 1h à température ambiante
3 lavages en PBS-Tween 20 0,1 %

Detection : IgG de chèvre anti IgG de souris conjugué à la phosphatase alcaline dilué dans une solution de PBS-Tween 20 0,1%-BSA 0,2 %
Incubation 100 µl, 1h à température ambiante
3 lavages en PBS-Tween 20 0,1 %
100 µl par puit de PNPP 30 minutes à 37°C
Lecture immédiate au spectrophotomètre à 405 nm

Bonne journée.