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CometAssay kit : probème d'adhésion de l'aragose

PostPosted: Thu 7 Jan 2016 11:19
by elouah
bonjour,

Après plusieurs essais, je rencontre toujours le même problème d'ahésion de l'agarose à la CometSlide, du kit CometAssay.
Est-ce déjà arrivé? Mon produit est-il défaillant? Auriez vous une idée de la cause de ce problème?

Bonne journée,

Cordialement

Re: CometAssay kit : probème d'adhésion de l'aragose

PostPosted: Thu 7 Jan 2016 13:47
by ulrich
Bonjour

Je pense que ces quelques indications qui pourraient vous aider à résoudre les problèmes d'ahesion de l'agarose sur les slides.

Il existe de nombreuses causes au fait que le LMAgarose ne reste pas attaché à la CometSlide.

1) Le tampon de migration est trop chaud. Contrôle de la température par re-circulation du tampon de migration ou effectuer l'essai à moins de 8 C.

2) Les cellules n'étaient pas lavées avant d'être combinées avec le LMAgarose.
Le pH du milieu et des protéines présentes dans le sérum peut réduire l'adhésion de l'agarose sur la slide. Assurez-vous de ne pas laver les slides avant de les utiliser.

3) Volume des cellules en suspension dans PBS 1X. pourcentage d’agarose était trop faible.
Ne pas augmenter le ratio de cellules/agarose fondu de plus de 1 à 10.

4) LMAgarose n'a pas été mis avant que les échantillons aient été traités.
Veiller à ce qu’un anneau séché de 0,5 mm d’épaisseur soit présent au bord de la CometSlide avant de réaliser l'électrophorèse.

5) LMAgarose est inégalement disposé sur la slide.
Veillez à la propagation uniforme d'agarose avec le flanc d'une pointe de pipette afin d'assurer l'uniformité du disque d'agarose et une meilleure adhérence.

J'espère que mon commentaire vous satisfait et que vous trouverez solution à votre problème.

Cordialement