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Bonjour,

Mon équipe a observé depuis quelques temps, sans pouvoir relier ce fait à un lot de fabrication que la sonde H2DCFDA n'était plus soluble dans l'éthanol ; actuellement nous utilisons donc du DMSO. Avez-vous une explication à ce changement ?

Merci d'avance,
Lubally

Bonjour Lubally,

J'utilise moi-même cette sonde de façon régulière, dans les conditions suivantes :
- modèle cellulaire utilisé : BAEC
- utilisation de plaques 96 puits à confluence.
- les cellules sont soumises à un stress par une solution de peroxyde d'hydrogène 800µM (dilution d'une solution concentrée de H2O2 dans du DMEM 1%glutamine, 1%PS, 1%SVF) pendant 30 minutes ou par du DMEM glucose 4,5g/L pendant 24 heures.
- puis les cellules sont mises en contact avec la sonde H2DCFDA (10µM dans du DMEM) pendant 45 minutes.
- la lecture est effectuée dans du PBS à 485/538 nm.

En espérant que cela t'ai aidé

Lise

Merci Lise, je vais essayer tes conditions, et si ça ne marche, je n'aurais qu'à revenir demander une autre solution