Bonjour,
Je vais utiliser le kit de couplage Lightning-Link rapid conjugation system (avec dylight 405)
J’ai un Ac purifié à 4.8 mg/ml, un autre à 1.8 mg/ml, un 3ème à 1 mg/ml
Dans le protocole, il est écrit « Ac de 1 à 2.5 mg/ml » => je dilue en PBS celui à 4.8 mg/ml
Et « 1 µl de LL-rapid modifier reagent pour chaque 10 µl d’Ac » « 10 µg à 2 mg » :
- je prépare mon Ac à concentration de 1 à 2.5 mg/ml
- je prélève x * 10 µl
- j’ajoute x µl de LL-rapid modifier reagent
- j’agite doucement : *DUREE, TEMPERATURE svp ?
*incubation avec LL rapid mix 15 min ou plus DUREE MAX svp ?
et enfin addition de LL rapid quencher
Vaut-il mieux me placer au milieu à environ 1 mg d’Ac couplé ou me mettre au maximum si j’ai assez d’Ac ?
Tous autres conseils seront bienvenus !
Cordialement